MUC蛋白在分泌性中耳炎積液形成中的作用

發布時間：2011/11/25 14:03:46

【摘要】目(mu)的(de)(de)：建(jian)立細(xi)(xi)菌及其產生的(de)(de)內(nei)(nei)毒(du)素誘導(dao)大(da)鼠分(fen)泌(mi)性中(zhong)(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)炎模(mo)(mo)型(xing)，并探討中(zhong)(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)黏(nian)膜(mo)中(zhong)(zhong)(zhong)分(fen)泌(mi)型(xing)黏(nian)蛋(dan)白(bai)的(de)(de)表達，及其對(dui)(dui)(dui)中(zhong)(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)積液(ye)(ye)產生和發展造成的(de)(de)影(ying)響。方法(fa)：20只SD健康大(da)鼠隨機分(fen)為對(dui)(dui)(dui)照組(zu)(zu)(zu)(10只)和實(shi)驗組(zu)(zu)(zu)(10只);實(shi)驗組(zu)(zu)(zu)建(jian)立滅活的(de)(de)流感嗜(shi)血桿菌引起(qi)的(de)(de)分(fen)泌(mi)性中(zhong)(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)炎模(mo)(mo)型(xing)，在不同(tong)時間段(duan)以(yi)鱟實(shi)驗法(fa)檢測中(zhong)(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)積液(ye)(ye)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)內(nei)(nei)毒(du)素，ELISA法(fa)檢測中(zhong)(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)積液(ye)(ye)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)黏(nian)蛋(dan)白(bai)。對(dui)(dui)(dui)取材(cai)黏(nian)膜(mo)常規染色(se)和APPAS染色(se)，觀察(cha)黏(nian)液(ye)(ye)腺、杯狀細(xi)(xi)胞(bao)。結(jie)果：實(shi)驗組(zu)(zu)(zu)中(zhong)(zhong)(zhong)鼓(gu)室(shi)上皮黏(nian)膜(mo)內(nei)(nei)毒(du)素含(han)量(liang)平(ping)均值(zhi)(zhi)是對(dui)(dui)(dui)照組(zu)(zu)(zu)鼓(gu)室(shi)上皮黏(nian)膜(mo)中(zhong)(zhong)(zhong)含(han)量(liang)的(de)(de)2.1倍(bei)，其平(ping)均值(zhi)(zhi)差異(yi)有顯(xian)(xian)著性(P<0.05)。ELISA法(fa)檢測中(zhong)(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)積液(ye)(ye)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)黏(nian)蛋(dan)白(bai)，實(shi)驗組(zu)(zu)(zu)鼓(gu)室(shi)上皮黏(nian)膜(mo)中(zhong)(zhong)(zhong)平(ping)均值(zhi)(zhi)是對(dui)(dui)(dui)照組(zu)(zu)(zu)中(zhong)(zhong)(zhong)平(ping)均值(zhi)(zhi)的(de)(de)4.2倍(bei)，其平(ping)均值(zhi)(zhi)差異(yi)有顯(xian)(xian)著性(P<0.05)。結(jie)論：細(xi)(xi)菌的(de)(de)分(fen)解產物—內(nei)(nei)毒(du)素，導(dao)致中(zhong)(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)黏(nian)膜(mo)的(de)(de)炎癥反應及中(zhong)(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)腔滲出，引起(qi)杯狀細(xi)(xi)胞(bao)分(fen)泌(mi)黏(nian)蛋(dan)白(bai)，從而導(dao)致產生中(zhong)(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)積液(ye)(ye)，甚至膠耳(er)(er)(er)。

【關鍵詞】黏蛋白;分泌性中耳炎;內毒素

分泌性中耳炎(OME)是指中耳腔存在積液而不伴有急性感染癥狀或體征的一類疾病。本病好發于兒童，特別是那些頑固性或持續性OME，患兒因聽力障礙可能導致言語發育遲緩、學習障礙及心理、行為異常，因而引起廣泛重視^①。由于OME的(de)發病機制(zhi)至(zhi)今尚未(wei)完全(quan)闡明，因(yin)此其治療效(xiao)果(guo)尚難以令(ling)人滿意。

現在看作，冒出OME的原因是多條件的，涉及到咽鼓管功效心里障礙、婦科感染和性變態表現等，但現在對其原因及疾患考核機制化還沒可以消除。而胃粘膜高產出冒出的中耳腔冒出難于消除的的代謝物是其主要是有特點。本科學檢測亟需研討產出性中耳炎的始動條件，從冒出中耳炎最經長見的致病性菌入手，科研日常細菌以至于形成的內黑色素怎么印象中耳胃粘膜黏蛋白質酶的產出;呈現內黑色素和黏蛋白質酶在產出性中耳炎積液的造成、成長 過程中中其起的功用，要怎樣深刻相識產出性中耳炎的疾患考核機制化，為臨床藥理醫學最早的時候診斷作為理論體系和科學檢測基本原則，為同產出性中耳炎的防冶和小朋友英語聽力訓練保護設計出不利于探索世界，為其臨床藥理醫學手術治療作為新基本思路。

1、資料與方法

1.1 一般資料

的選擇的健康SD大鼠20只，雌雄拘泥于，身高體重200～250mg，電耳鏡檢查報告不在其內中耳病癥。隨機性分類三組，試驗組的選擇分泌物性中耳炎常用見的致病菌菌——消滅的流感病毒嗜血桿菌，以1%戊巴比妥(30mg/kg)經腹腔針劑局麻后，經鼓膜前留言板侵入沙門氏菌浮動液0.1mL，針劑前在瓊脂塑造計劃基上塑造計劃，維持并沒有活的菌株種子發芽，為了防止出現發生急性染病;較組侵入等量生理方面茶水。

1.2 研究方法

激光祛痘1，3，7，14，18d用1%苯巴比妥鈉將大鼠全麻，在治療體視顯微鏡下分析鼓膜社會形態、字體顏色和光澤感，過后js隨機數處死三組中2只大鼠，取兩側聽泡，用10%裝修甲醛固定不變后脫鞘，石蠟包埋切塊，正常HE印染光鏡下分析，取一塊塊胃粘膜組織性配電鏡檢驗。胃粘膜正常印染和APPAS印染，分析分必物腺、杯狀癌細胞。在各不相同時段以鱟實驗英文法檢查中耳積液中的內毒物，ELISA法檢查中耳積液中的黏淀粉酶。

1.3 統計學方法

以算機外掛二維量測法分折團隊學可是。幾乎所有數據進行分析相關資料由SPSS13.0小軟件做數據進行分析分折，檢則水準器α=0.05。

2、結果

查看鼓膜狀況：沒問題大鼠的鼓膜透白，鼓室無積液，錘骨柄和光錐流暢可辨;造模后大鼠的鼓膜發渾，鼓室積液，光錐蒸發。 手術1d，APPAS刺繡正常值組和比較組中耳胃粘膜鼓岬處由立方米或扁長上皮和薄層結締聚集(一直有層)構成，胃粘膜下一層有極少彈性黏膠黏膠人造纖維素母內部和稍微膠原彈性黏膠黏膠人造纖維素還有弱酸性多核白內部、淋巴結內部，光鏡下所有建模方法組咽鼓管上皮檔次出現，黏物腺管擴長、個數出現，小動靜脈很深沖血了并有弱酸性粒內部侵潤性和多出現的分秘出內部。手術1周建模方法組鼓室胃粘膜上皮內部和杯狀內部很深增加，炎性內部侵潤性很深，電鏡下不難發現多杯狀(分秘出)內部齊聚，外表有微毛毛，內部內有多成熟完善的亮小粒肥料和稍微暗小粒肥料，部件擺放到胃粘膜外表，呈分散的團狀，上皮內部的內質網擴長，線粒體扭曲，核固縮或大部分內部結構設計不清，胃粘膜下孔隙動靜脈擴長沖血了，很深增加。手術2周組和4周組出現成彈性黏膠黏膠人造纖維素內部增加，有很多彈性黏膠黏膠人造纖維素母內部和膠原彈性黏膠黏膠人造纖維素，新生報到動靜脈出現，單線程巨噬內部侵潤性，中耳胃粘膜很深增寬，在內部間和胃粘膜下一層有很多黏物內部和黏物滴。 醬紫1，3，7，14，18d以鱟測試操作法查重中耳積液中的內毒性，后果體現 測試操作組中內毒性的含量暫時間的新增而新增，差不多參考值(218.0±191.9)μg/106，是對照組鼓室上皮胃粘膜(101.57±653.4)μg/106的2.1倍，其差不多值對比有可觀性(P<0.05)。ELISA法查重中耳積液中的黏蛋白酶，測試操作組鼓室上皮胃粘膜中差不多參考值(4918.0±1931.9)μg/106，是對照組鼓室上皮胃粘膜中差不多值(1001.45±263.8)μg/106的4.2倍，其差不多值對比有可觀性(P<0.05)。

3、討論

分泌性中耳炎是耳鼻咽喉科常見病之一，是小兒聽力障礙的主要原因，嚴重影響患兒的語言發育和智力發育。尤其是慢性分泌性中耳炎，病程長，遷延不愈，如不及時治療則易導致鼓膜萎縮、鼓室硬化、慢性中耳炎、膽脂瘤、膽固醇肉芽腫等。其發病與中耳黏膜腺體和杯狀細胞的增生有關，黏膜高分泌引起的中耳腔出現不易清除的黏液是其主要特征^②。黏蛋白(bai)是黏液的主要成分(fen)，是一種高度糖(tang)基化的大(da)分(fen)子(zi)蛋白(bai)質，目前研究(jiu)認為其高表達與中(zhong)耳炎發病(bing)關系密切。

到目前為止，人體中至少有9種不同的黏蛋白已被確認，按其發現順序命名為MUC1～4，MUC5AC，MUC5B，MUC6～8^③⑧。MUC1，MUC3和MUC4屬于膜結合型黏蛋白;MUC2，MUC5AC，MUC5B和MUC6屬于分泌型黏蛋白;MUC8尚未確定。現已證明MUC2，MUC5AC，MUC5B和MUC6黏蛋白的基因定位于染色體11P15.5，人們認為它們來源于同一原始基因，因此它們具有結構和基因序列的相似性。MCUI定位于染色體1q21～24，MUC3定位于染色體7q22，MUC4定位于3q29，MUC7定位于4q13～21，MUC8定位于12q24.3^⑨。由(you)于(yu)黏蛋白(bai)(bai)基因的(de)激活和滅(mie)活具(ju)有器官特(te)異(yi)性和上皮細(xi)胞特(te)異(yi)性，因此某種(zhong)特(te)定的(de)上皮細(xi)胞其黏蛋白(bai)(bai)基因表(biao)達(da)模式(shi)不(bu)同。

從總體看，黏蛋白可被分成兩組：一組為分泌型黏蛋白(MUC2，MUC5B，MUC5AC，MUC6)，它以膠體形式存在于黏膜表面，其基因編碼簇位于11P15染色體上。另一組為膜結合型黏蛋白，存在于上皮細胞的表層，MUC1，MUC3，MUC4均以跨膜形式存在。黏蛋白是由杯狀細胞分泌的，分布在上皮的表面，與細胞黏附、細胞保護、管腔表面潤滑、入侵微生物的捕獲以及腫瘤生物學等有關。黏蛋白多肽骨架的氨基酸序列有以下特點：高度串聯重復氨基酸序列組成的結構域占極高比例;重復單位富含具羥基側鏈的絲氨酸和蘇氨酸;重復單位的兩側(N和C端)富含半胱氨酸。成熟的黏蛋白羥基側鏈糖基化后形成O連接寡糖的糖蛋白;黏蛋白亞單位之間還可以通過半胱氨酸殘基的巰基(HS)側鏈相互作用形成二硫鍵，構成黏蛋白聚合體，使得黏液具有膠狀特點^⑩。其(qi)中MUC1，MUC4和(he)MUC5AC的(de)表達始終局限(xian)于(yu)表面上(shang)皮細(xi)胞(bao)(bao)，前兩(liang)者(為膜結合型(xing)黏蛋白)表達于(yu)杯狀和(he)纖毛細(xi)胞(bao)(bao)，MUC5AC只在(zai)杯狀細(xi)胞(bao)(bao)表達。

內毒素是細菌死亡時釋放出的一種具有生物活性的物質。它的主要成分為脂多糖，能引起中耳黏膜結締組織增生，細胞密度增大，毛細血管通透性增高，腺體及杯狀細胞分泌增加，破壞正常黏膜運轉系統，促進中耳積液的蓄積，導致分泌性中耳炎遷延不愈。Yanagihara等^⑾報道(dao)，向大鼠氣管內(nei)(nei)(nei)(nei)滴(di)入綠(lv)膿(nong)假單胞菌(jun)內(nei)(nei)(nei)(nei)毒(du)(du)素(su)(su)(su)，引起大量的(de)(de)中(zhong)(zhong)性(xing)粒細(xi)胞募集和(he)廣泛的(de)(de)氣道(dao)上皮(pi)(pi)細(xi)胞表(biao)型的(de)(de)改(gai)變，即(ji)有(you)大量的(de)(de)黏(nian)液(ye)細(xi)胞的(de)(de)增(zeng)生(sheng)(sheng)與化(hua)生(sheng)(sheng)，MUC5ACmRNA表(biao)達和(he)蛋白(bai)分(fen)泌均增(zeng)高。此外內(nei)(nei)(nei)(nei)毒(du)(du)素(su)(su)(su)也可經(jing)過經(jing)典途徑及(ji)替(ti)補途徑激活補體，使嗜堿性(xing)粒細(xi)胞或肥(fei)大細(xi)胞釋放組(zu)織胺、5羥色胺、激肽和(he)其(qi)他血(xue)管活性(xing)介質(zhi)作用(yong)于靶細(xi)胞，從而(er)引起血(xue)管擴張(zhang)，毛細(xi)血(xue)管通透性(xing)增(zeng)加(jia)，同(tong)時(shi)(shi)趨化(hua)因子能吸引白(bai)細(xi)胞向炎(yan)癥病灶部位聚集，促(cu)進吞噬(shi)。在發(fa)揮(hui)吞噬(shi)作用(yong)的(de)(de)過程中(zhong)(zhong)，釋放溶酶體酶等生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)(wu)活性(xing)物(wu)(wu)(wu)質(zhi)，除破壞抗原性(xing)異(yi)物(wu)(wu)(wu)外，同(tong)時(shi)(shi)也可損傷鄰近(jin)組(zu)織和(he)加(jia)劇炎(yan)癥，參與分(fen)泌性(xing)中(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)(er)炎(yan)的(de)(de)發(fa)病。本研究表(biao)明(ming)：細(xi)菌(jun)感染(ran)引起的(de)(de)分(fen)泌性(xing)中(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)(er)炎(yan)中(zhong)(zhong)，鼓(gu)室(shi)黏(nian)膜(mo)內(nei)(nei)(nei)(nei)毒(du)(du)素(su)(su)(su)的(de)(de)含量及(ji)杯狀細(xi)胞明(ming)顯增(zeng)多，黏(nian)蛋白(bai)的(de)(de)分(fen)泌也明(ming)顯增(zeng)加(jia)。這與上述文獻相符(fu)，說明(ming)內(nei)(nei)(nei)(nei)毒(du)(du)素(su)(su)(su)可能是導致分(fen)泌性(xing)中(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)(er)炎(yan)出現黏(nian)性(xing)滲(shen)液(ye)的(de)(de)始動(dong)因素(su)(su)(su);在急性(xing)中(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)(er)炎(yan)發(fa)展為(wei)慢性(xing)分(fen)泌性(xing)中(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)(er)炎(yan)過程中(zhong)(zhong)，中(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)(er)積(ji)液(ye)與內(nei)(nei)(nei)(nei)毒(du)(du)素(su)(su)(su)和(he)黏(nian)蛋白(bai)含量存在某(mou)種關聯。由此推斷，針對(dui)某(mou)一特定時(shi)(shi)期使用(yong)降(jiang)解內(nei)(nei)(nei)(nei)毒(du)(du)素(su)(su)(su)的(de)(de)藥(yao)物(wu)(wu)(wu)，可以提高機體對(dui)內(nei)(nei)(nei)(nei)毒(du)(du)素(su)(su)(su)耐受(shou)力的(de)(de)糖皮(pi)(pi)質(zhi)激素(su)(su)(su)類藥(yao)物(wu)(wu)(wu)，有(you)助(zhu)于減輕內(nei)(nei)(nei)(nei)毒(du)(du)素(su)(su)(su)對(dui)中(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)(er)黏(nian)膜(mo)的(de)(de)損害(hai)，并消除中(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)(er)滲(shen)液(ye)。抗流(liu)感嗜血(xue)桿菌(jun)抗體對(dui)流(liu)感嗜血(xue)桿菌(jun)引起的(de)(de)中(zhong)(zhong)耳(er)(er)(er)(er)炎(yan)可能具有(you)保(bao)護作用(yong)。

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