互養菌屬與口腔疾病關系的研究進展
【摘要】近年來,互(hu)養(yang)菌(jun)(jun)屬(shu)(shu)(shu)廣泛存在(zai)于自然界中,但(dan)在(zai)棲居(ju)地所有細(xi)菌(jun)(jun)組成中比例較小,大部分(fen)(fen)不(bu)能用純(chun)培養(yang)的(de)(de)(de)方法(fa)分(fen)(fen)離和純(chun)化。該菌(jun)(jun)屬(shu)(shu)(shu)顯示(shi)出(chu)特殊的(de)(de)(de)生(sheng)理生(sheng)化特性和適應環(huan)境的(de)(de)(de)能力,尤其(qi)是(shi)在(zai)口(kou)腔(qiang)(qiang)環(huan)境內。研究顯示(shi),牙(ya)周病(bing)(bing)(bing)和牙(ya)髓感染等病(bing)(bing)(bing)理狀態(tai)樣本(ben)中互(hu)養(yang)菌(jun)(jun)屬(shu)(shu)(shu)具(ju)有較高的(de)(de)(de)檢出(chu)率,故(gu)懷(huai)疑(yi)其(qi)可(ke)能是(shi)口(kou)腔(qiang)(qiang)疾(ji)病(bing)(bing)(bing)的(de)(de)(de)病(bing)(bing)(bing)原(yuan)體(ti)之一。下面(mian)就互(hu)養(yang)菌(jun)(jun)屬(shu)(shu)(shu)與口(kou)腔(qiang)(qiang)疾(ji)病(bing)(bing)(bing)的(de)(de)(de)關系作(zuo)一綜(zong)述。
【關鍵詞】互養菌屬;牙周病;牙髓炎
互養菌屬(Synergistes)是近期來新挖掘的病菌屬,應用軟件團伙生態學學的工藝挖掘,該菌屬豐富來源于于當然界另外在齒科里面患病有較高的排除率。牙體炎病、齲病和牙髓炎是齒科里面多發性有魅力染性患病,病菌是可能會導致一些患病的始客觀的因素子,是致使牙體牙體炎聚集損害的包括的因素。熟知 新的菌屬在齒科里面患病中的排除率,相對 進幾步清晰明確齒科里面患病的發生緣由和考核評價臨床藥理制療有著注重的實際意義。1、互養菌屬的來源和特殊性質
1992年,Allison等①從羊反芻食物中分離出的革蘭陰性厭氧的柱狀互養菌屬,有降解豆類植物銀合歡中的毒素3,4-二羥基吡啶(3,4-dihy-droxy pyridine,3,4-DHP)復合物的能力,能夠幫助宿主動物生存。他們將其命名為窮氏互養菌(Synergiste sjonesii,S.jonesii)。該菌與其他細菌相比較有較小的同源性,代表新的菌屬,這是首次在自然界中發現并分離的互養菌屬。在《伯杰系統細菌學手冊》中,將其歸類于脫鐵桿菌門(Defer-ribacteres)②,基因文庫中收(shou)錄其1164個(ge)核苷酸序(xu)列,其中Core Nucleotide收(shou)錄260個(ge),GSS收(shou)錄904個(ge)序(xu)列。
16SrDNA聚合酶鏈反應(polymerasechainreaction,PCR)分析發現,互養菌屬廣泛存在于自然界中③,但該菌在各自棲居地所有細菌組成中比例較低。互養菌屬中僅有少部分革蘭陰性、專性厭氧的桿菌、弧菌和能動菌菌種可通過特殊培養基分離純化,大部分可培養菌種在常溫中性環境中適宜生長,另有一些菌種能夠耐受鹽環境或者高溫條件(最適溫度55~65℃)。所有菌種的共同特性是具有降解氨基酸的能力,可能參與氨基酸在自然生態系統中的轉換④⑥。
不同環境來源的互養菌屬具有適應環境的特殊能力:從動物反芻食物中分離出的能夠以精氨酸和組氨酸作為底物,降解動物飼料中的毒素,幫助動物生存①;厭氧生態系統來源的可發酵谷氨酸、白氨酸和異亮氨酸,水解明膠,不產生吲哚,不發酵單糖,但是當用丁酸甘油酯和橄欖油測試時不能產生脂肪酶④;還有一些菌種可在厭氧消解罐中利用葡萄糖、硝酸鹽降解蛋白質性廢物⑤;在蓄積醋酸鹽危象環境中分離出的,能夠始終保持高密度并隨環境改變而變化⑥。
Horz等⑦描述了(le)人(ren)類(lei)來源的(de)(de)(de)(de)可培(pei)養互(hu)養菌(jun)屬的(de)(de)(de)(de)生化特征(zheng)和(he)抗菌(jun)敏感性:從(cong)腹水(shui)和(he)軟組織感染灶中(zhong)分離(li)出的(de)(de)(de)(de)7株菌(jun)株都是(shi)緩慢生長的(de)(de)(de)(de)厭(yan)氧菌(jun),形(xing)態學(xue)上相似,但(dan)對抗菌(jun)劑的(de)(de)(de)(de)抵(di)抗性有(you)所不(bu)同。根據厭(yan)氧菌(jun)識別系統發(fa)現,僅(jin)有(you)RMA14551株能水(shui)解甘氨(an)酸-β-萘胺,其他菌(jun)株的(de)(de)(de)(de)酶促反(fan)應與所測試的(de)(de)(de)(de)表型相似的(de)(de)(de)(de)厭(yan)氧革蘭陰性桿菌(jun)與之(zhi)相反(fan)。
2、與口腔疾病相關的互養菌屬
應用分子生物學方法研究1名健康受試者7個口腔內棲居地,在任何位置都沒有檢測出互養菌屬的基因型⑧。然而,該(gai)菌卻(que)在(zai)齲病(bing)(bing)(bing)、牙周炎、牙髓炎和根尖(jian)周病(bing)(bing)(bing)樣本中(zhong)檢(jian)出,而且檢(jian)出率(lv)甚至超(chao)過(guo)(guo)已(yi)確定的(de)病(bing)(bing)(bing)原菌的(de)數量。相對于健康狀態而言(yan),在(zai)口腔(qiang)疾病(bing)(bing)(bing)中(zhong)互(hu)養菌屬具有較高的(de)檢(jian)出率(lv),故(gu)可(ke)推(tui)測(ce)該(gai)菌屬在(zai)口腔(qiang)疾病(bing)(bing)(bing)的(de)發(fa)病(bing)(bing)(bing)過(guo)(guo)程(cheng)中(zhong)起重(zhong)要(yao)的(de)作用。
2.1 互養菌屬和牙周病
慢性牙周炎有復雜的細菌生態系,已在齦溝中探測到400多種細菌。互養菌屬是早期的研究者在用萬能16SrRNA基因引物探測人齦下菌斑細菌和采用PCR選擇性地探測其他基因型時偶然發現的。deLillo等⑨收集了2名重度慢性牙周炎患者的3個齦下菌斑樣本,在以16SrRNA序列分析技術識別菌斑中的細菌時發現,1.2%的細菌克隆可歸類于互養菌屬。Paster等⑩初期在采用人類口腔微(wei)(wei)生物識別微(wei)(wei)陣列(humanora licroide-ntification microarray,HOMIM)比較健康受(shou)試者(zhe)和牙周炎齦下菌(jun)(jun)斑的(de)(de)細菌(jun)(jun)分布時發(fa)現互養菌(jun)(jun)屬出現于疾(ji)病樣本中,之后(hou)他們用16SrRNA序列分析識別牙周袋中的(de)(de)最主要(yao)的(de)(de)69個(ge)微(wei)(wei)生物,確定了互養菌(jun)(jun)屬的(de)(de)相(xiang)關基因型(BH017、D084和W090)。
Paster等⑾通過對牙(ya)周(zhou)(zhou)健康狀態、成人(ren)牙(ya)周(zhou)(zhou)炎(yan)(yan)、難治性(xing)牙(ya)周(zhou)(zhou)炎(yan)(yan)、免疫缺陷性(xing)牙(ya)周(zhou)(zhou)炎(yan)(yan)和急性(xing)壞死(si)性(xing)潰瘍性(xing)牙(ya)周(zhou)(zhou)炎(yan)(yan)等不同(tong)牙(ya)周(zhou)(zhou)袋內(nei)細菌(jun)分布的調查,從347個克隆中(zhong)鑒(jian)定出29個菌(jun)種和基因型(xing),且互(hu)養菌(jun)屬(shu)的BH017、W090、D084和W028基因型(xing)在疾病樣本中(zhong)占(zhan)優勢,特別是在急性(xing)壞死(si)性(xing)潰瘍性(xing)牙(ya)周(zhou)(zhou)炎(yan)(yan)和難治性(xing)牙(ya)周(zhou)(zhou)炎(yan)(yan)中(zhong),暗示該菌(jun)可(ke)能是病原體之一。
盡管互養菌屬的部分克隆在牙周炎樣本中屢有發現,但是該菌的基因型與疾病狀態并非一一相關。Kumar等⑿在比較年齡相當的牙周健康和慢性牙周炎受試者過程中發現,該菌屬基因型D084和BH017在所測試的菌種中與疾病的聯系最為密切,與以前廣泛確認為慢性牙周炎的主要病原體有相同的強度甚至更強。這就再次證實,這些以前不能通過培養方法識別的微生物在牙周炎的發病過程中起重要的作用。另外,由于基因型W090在牙周健康樣本中數量上占優勢;所以Kumar等⑿認為,盡管W090與D084、BH017種系關系相近,但不能以種系來源的遠近確定其與疾病的關系。之后,他們在進一步地研究牙周炎患者和健康受試者牙周袋深淺位置的細菌分布中發現,互養菌屬存在于1/8的疾病受試者中,也同樣存在于健康受試者中。基因型W090和BH007與牙周疾病密切相關,而基因型BH017與牙周疾病沒有統計學相關性⒀。
日前,關與互養菌屬某染色體型與根尖周炎病炎的密切關系尚未蓋棺定論,有害菌病毒區域劃分也許 因個體戶宿主細胞不一而不一。鑒于根尖周炎病炎能夠引起病發的考核機制的繁復性,成了取得較多更具體的與根尖周炎病炎能夠引起病發的關與的有害菌病毒信心,還要有更好人數的臨床上樣表理論研究。2.2 互養菌屬和牙髓感染
根管程序內養分和二氧化碳氣特別受阻,涵蓋牙髓炎的結核桿菌種屬相比于都牙科生物工程一般來說規模是限制的。跟隨互養菌屬在牙病病樣表中的知道,這一菌屬有無出來在其他牙科多發性急病——牙髓炎中,導致了教學科研工做者的諸多注意。Saito等⒁用16SrRNA序列分析了7例牙髓感染根管內的細菌樣本,互養菌屬在其中的比例不等,最高達到9.1%。在慢性根尖周炎感染根管樣本中,存在著包括互養菌屬在內的可培養和迄今不能培養的菌種⒃。在未行治療的感染根管中,互養菌屬的基因型包含W028、A121/P4G-18P1、W090、BH017和E3-33⒂。互養菌屬陽性檢出率為21.8%,平均量高于牙齦卟啉單胞菌和中間普雷沃菌菌屬,接近密螺旋體的檢出率⒄。研究者們認為,即使互養菌屬的病原性和致病因子仍需要解釋,但互養菌屬的流行率和數量提示其在根尖周炎的病原學中可能與其他微生物有協同作用,利用終產物如氫分子在多種微生物感染牙髓的過程中依次發揮作用。Vianna等⒄發現了1例牙髓(sui)樣(yang)本中(zhong)包(bao)含互養(yang)菌屬遠緣的(de)(de)(de)基(ji)因(yin)型,與從腹水中(zhong)分(fen)離(li)的(de)(de)(de)菌株(zhu)相關。這樣(yang)的(de)(de)(de)基(ji)因(yin)型之前(qian)未能在口腔(qiang)中(zhong)檢測到,表(biao)示感染根管是(shi)互養(yang)菌屬基(ji)因(yin)型種系發生的(de)(de)(de)特殊棲(qi)居地。
在對比慢性根尖周炎治療前后根管內細菌組成的研究中,關于互養菌屬基因型的出現仍存在分歧意見。Siqueira等⒅在針對性地選擇13個菌種研究其在未治療和治療后持續感染的慢性根尖周炎的檢出率時發現,互養菌屬基因型BA121是未治療的根尖周炎中最流行的3個菌種之一,而且這個基因型仍能在治療后持續感染的病例中檢測出來。這也是第一次在營養高度受限的根充后根管內檢測出該菌屬。Sakamoto等⒆在評(ping)估根管(guan)內(nei)(nei)消毒措施和(he)檢(jian)測(ce)治療后(hou)(hou)根管(guan)內(nei)(nei)殘留微生(sheng)物的(de)(de)研究中(zhong)(zhong)發現(xian),互養菌屬(shu)基因型(xing)BA121出現(xian)于(yu)治療前的(de)(de)樣本(ben)(ben)中(zhong)(zhong),缺失于(yu)治療后(hou)(hou)的(de)(de)樣本(ben)(ben)中(zhong)(zhong)。他們認為,這可(ke)能緣于(yu)治療過程中(zhong)(zhong)的(de)(de)次氯(lv)酸鈉和(he)氫氧化(hua)鈣的(de)(de)羥基離子有殺死(si)細菌和(he)降(jiang)解其DNA的(de)(de)作用,從而影響了PCR的(de)(de)精確結果。
理論與實踐上,營養有勃勃生機的根管系無菌操作場景,一點在影響根管中發現了的有機肥料體既可以是疾細菌體,也可以是齒科總共生下了的要求疾細菌。互養菌屬是在腸道疾病牙髓園林系頻煩有的員工,比例圖大至與主要的牙髓疾細菌體相同,描述該菌屬與牙髓影響和根尖周病有主要的保持聯系,可以是剛剛不明確的牙髓疾細菌體。2.3 互養菌屬與齲病
有關互養菌屬與齲病的報道較少。Munson等⒇在(zai)針對穩(wen)定期(qi)和(he)進展(zhan)期(qi)齲齒(chi)微生(sheng)物群落(luo)的(de)研究中發現,互養(yang)菌屬僅(jin)出(chu)現于(yu)2個樣(yang)本(ben)中,僅(jin)組成樣(yang)本(ben)所(suo)有細菌分離(li)群的(de)小部分,低于(yu)10%。
3、結束語
互養菌屬在天然區域中豐富勻稱,或許是和人動物界腸內中的健康菌群,或許直接參與結膜有關的感動。用專項 手段方式分離塑造互養菌屬,可對其順利基本本質特征有進三步的認清并能幫住了解一下其在人宿主細胞中的居住在了手段和發病性目的。氧分子海洋生物技術學論述探討全新升級了人-真菌生態環保系中互養菌屬為專項 班子成員的的觀點,更減少了唇齒內部急病相關發病性微海洋生物技術的時間范圍,在這其中包括某些近由16SrRNA編碼序列認別的新定名的唇齒內部菌苗和新的基因組型。下列論述探討顯示,當下急切必須要放置和長時間兌換互養菌屬的身體外塑造手段方式,這互養菌屬的表型基本本質特征,尤其要是毒力和抑菌劑神經辨別力認識等才行得見適度的考評。【參考文獻】
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